線粒體前體蛋白信號序列的特點是：①多位于肽鏈的N端，由大約20個氨基酸構(gòu)成；②沒有帶負(fù)電荷的氨基酸，形成一個兩性α螺旋，帶正電荷的氨基酸殘基和不帶電荷的疏水氨基酸殘基分別位于螺旋的兩側(cè)，現(xiàn)在認(rèn)為這個螺旋與轉(zhuǎn)位因子的識別有關(guān)；③對所牽引的蛋白質(zhì)沒有特異性要求，非線粒體蛋白連接上此類信號序列，也會被轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體。此外有些信號序列位于蛋白質(zhì)內(nèi)部，完成轉(zhuǎn)運(yùn)后不被切除，還有些信號序列位于前體蛋白C端，如線粒體的DNA解旋酶Hmil。
線粒體具有四個功能區(qū)隔，即外膜、內(nèi)膜、膜間隙、基質(zhì)。進(jìn)入不同部位的蛋白具有不同的轉(zhuǎn)運(yùn)途徑。
進(jìn)入外膜的蛋白具有不被切除的N端信號序列，其后還有疏水性序列作為停止轉(zhuǎn)移序列，然后蛋白質(zhì)被TOM復(fù)合體安裝到外膜上，如線粒體的各類孔蛋白。
進(jìn)入基質(zhì)蛋白質(zhì)可以先通過TOM復(fù)合體進(jìn)入膜間隙，然后通過TIM復(fù)合體進(jìn)入基質(zhì)。也可以通過線粒體內(nèi)、外膜間的接觸點（鼠肝直徑1um線粒體上約115個接觸點），一步進(jìn)入基質(zhì)，在接觸點上TOM與TIM協(xié)同作用完成蛋白質(zhì)向基質(zhì)的輸入
。
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